5'... G A T/A T  C ...3'
3'... C T A/T A  G ...5'
快速内切酶，可在5~15 min内完成反应
反应温度为37℃
受EcoBI甲基化影响，序列可能重叠，剪切可能受影响
失活条件为80℃温育20 min
3 h温育未表现星号活性，延时酶切可能出现星号活性
同裂酶：Eco32I